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这两天在做细胞表型实验,第一个想攻克的,就是克隆形成。要求是50-100-200个细胞。用血球计数板,对消化的细胞进行计数,是在2×10^5个/ml.那么问题来了,随后怎么保证是要求的细胞数呢?用稀释法?总觉得不够准确呢。
目前有一批样本的处理是:放液氮速冻之后放在-80℃冰箱。已经半年时间,想问一下,之后组织打算做冰冻切片,应该怎么取出?是直接取出拿去OCT包埋?还是有其他处理操作,比如加PBS,第一次操作,求高人指教谢谢!
用PET46-,表达his融合蛋白,考马斯亮蓝可以看到表达条带,western检测HIS标签,却杂不出来,求帮助,已经做了很多次了,就是杂不出来,蛋白也重新纯化过了两次了,考马斯亮蓝染色带是没问题的,western用His抗体就是检测不到条带,加了一个阳性对照却有条带,不知道是什么原因
请分享一下胞浆蛋白和核蛋白分离的具体步骤。和所用溶液的配制。最好是自己有实际经验的,谢谢!
请问成纤维细胞传代过程中出现空泡,有木有小伙伴知道是怎么回事呢?
做了小鼠胰腺的HE染色,发现模型组里细胞质中有黑点(对照组没有这么明显的),求问这是样本的问题,还是病理上引起的呢,有可能是细胞凋亡之类的么?
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